品牌 | ACD |
用途 | RNA-FISH定位定量 |
英文名稱 | RNAscope 2.5 HD Reagent Kit-Red |
包裝規(guī)格 | 1kit/盒 |
純度 | % |
別名 | RNAscope 2.5高敏感性試劑盒 |
分子式 | / |
RNAscope 2.5高敏感性試劑盒(紅色)是基于ACD專利的信號(hào)放大和背景抑制技術(shù)的RNA原位雜交試劑盒,能夠靈敏地將固定于載玻片上的樣本中每個(gè)細(xì)胞中的單個(gè)RNA分子可視化。RNAscope 原位雜交不需要傳統(tǒng) ISH 所必須的無(wú)RNA 環(huán)境。該試劑盒是目前市面上靈敏度最佳的試劑盒,能夠用于表達(dá)水平低的RNA的檢測(cè)。
使用經(jīng)適當(dāng)制備的組織樣品,首先預(yù)處理切片,然后使用RNA特異性探針與靶標(biāo)RNA雜交。通過(guò)多步過(guò)程放大信號(hào),然后將樣品與辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的探針雜交,最后采用發(fā)色底物檢測(cè)。每個(gè)單個(gè)RNA轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物都會(huì)形成明顯的發(fā)色團(tuán)沉淀物點(diǎn),可在普通亮視野顯微鏡下放大40-100倍進(jìn)行觀察。由于具有額外的放大步驟,在RNAscope® 2.5 分析中,放大 10-20 倍也可觀察結(jié)果。RNAscope® 2.5分析提供兩種可選的檢測(cè)試劑盒:棕色(DAB)和紅色(Fast Red),經(jīng)它們可視化處理后的 RNA 分子分別為棕色或紅色發(fā)色點(diǎn)。
試劑盒特點(diǎn):
靈敏度高:能夠做到單分子水平檢測(cè),能夠檢測(cè)低豐度表達(dá)RNA(1-20拷貝/細(xì)胞);
- 樣本適用類型:該試劑盒能夠用于石蠟切片、冰凍切片、細(xì)胞爬片和外周血單個(gè)核細(xì)胞等樣本;
- 結(jié)果易于觀察:RNAscope 2.5高敏感性試劑盒(紅色)通過(guò)使用Fast Red進(jìn)行顯色,使顯色結(jié)果與背景有較高的對(duì)比度,有利于信號(hào)的識(shí)別。在肺、肝、視網(wǎng)膜和皮膚等組織標(biāo)本中,往往由于色素沉著造成 DAB 顯色染色與色素沉著物區(qū)分困難。ACD推薦RNAscope 2.5 HD紅色試劑盒 進(jìn)行顯色。RNAscope 2.5 HD紅色試劑盒使用Fast Red進(jìn)行顯色,使顯色結(jié)果與背景有更高的對(duì)比度,而且對(duì)比蘇木精染色,紅色更突出,在標(biāo)準(zhǔn)明場(chǎng)顯微鏡下更容易識(shí)別,因此ACD也建議使用此法檢測(cè)表達(dá)水平更的基因。
- 明場(chǎng)、熒光均可見(jiàn):顯色結(jié)果在標(biāo)準(zhǔn)明場(chǎng)顯微鏡下即可觀察。也可在550nm激發(fā),在熒光顯微鏡下可觀察。