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| 產(chǎn)地 | 中國 |
| 品牌 | 華雅干細(xì)胞 |
| 貨號(hào) | E8725F |
| 用途 | MSC細(xì)胞培養(yǎng) |
| 包裝規(guī)格 | 450+50mL/套 |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
E8725F HY STEMCELL自主研發(fā) MSC細(xì)胞培養(yǎng)基 現(xiàn)貨
產(chǎn)品組份：
DMEM/F12 base Essential GFs
Glutamine Transferrin
NaHCO3 Albumin
Selenium Insulin
完全培養(yǎng)基的配制：
將完全溶解的CCGmHuM®Human MSCs Supplement Medium（10x）細(xì)胞因子添加物加入到相應(yīng)體積的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中，充分混合均勻，制備成完全培養(yǎng)基。培養(yǎng)基和CCGmHuM®Human MSCs Supplement Medium（10x）細(xì)胞因子添加物的混合比例為9:1，即每9mL基礎(chǔ)培養(yǎng)基需要添加1mL細(xì)胞因子添加物。
為維持添加物中細(xì)胞生長因子的活性，請(qǐng)將配制好的完全培養(yǎng)基置于4℃避光保存，儲(chǔ)存時(shí)間不宜超過4周，1周內(nèi)用完 。
人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)：
1.將骨髓樣品制備成單細(xì)胞懸液，推薦使用密度梯度離心法獲得單個(gè)核細(xì)胞進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)。
2.PBS清洗細(xì)胞兩次。
3.棄上清，用完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。
4.細(xì)胞計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度為5～7.5×106/mL。
5.根據(jù)擬采用培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的底面積，計(jì)算接種細(xì)胞總量。
6.將接種好的細(xì)胞置于5% CO2，濕度大于95%的37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。根據(jù)細(xì)胞生長狀況換液。
脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的分離：
1. 人脂肪組織來自脂肪抽吸患者的廢棄脂肪組織。
2. 無菌PBS反復(fù)漂洗除菌。
3. 將脂肪組織轉(zhuǎn)移至50mL或250mL離心管，加入等體積的使用alpha-MEM配制的膠原酶溶液，使其終濃度達(dá)到0.1%（重量/體積）。
4. 37℃，搖床（120rpm）消化2小時(shí)以上。
5. 室溫靜置10分鐘，吸除上層油滴。
6. 離心，800g，10分鐘，收集消化細(xì)胞。
7. PBS洗滌一次，500g，10分鐘。MSCs無血清完全培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞。
8. 計(jì)細(xì)胞數(shù)，調(diào)整細(xì)胞濃度，按照5～10×105/cm2底面積接種。
9. 次日觀察，如無污染，繼續(xù)培養(yǎng)至培養(yǎng)基顏色變黃，或貼壁細(xì)胞密度達(dá)到30%以上。補(bǔ)充新鮮的MSC無血清完全培養(yǎng)基。
10. 細(xì)胞密度達(dá)到80%左右時(shí)，按照以下步驟傳代培養(yǎng)。
E8725F HY STEMCELL自主研發(fā) MSC細(xì)胞培養(yǎng)基 現(xiàn)貨
