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| 產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
| 品牌 | Beyotime |
| 貨號(hào) | S0033S |
| 用途 | 活性氧檢測(cè) |
| 英文名稱 | Reactive Oxygen Species Assay Kit |
| 包裝規(guī)格 | >100次 |
| 純度 | % |
| 是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品名稱：Beyotime S0033S 活性氧檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：S0033S
產(chǎn)品品牌：Beyotime
產(chǎn)品產(chǎn)地：國(guó)內(nèi)
產(chǎn)品規(guī)格：>100次
用途范圍：活性氧檢測(cè)
產(chǎn)品介紹：
活性氧檢測(cè)試劑盒是一種利用熒光探針DCFH-DA進(jìn)行活性氧檢測(cè)的試劑盒。DCFH-DA本身沒有熒光，可以自由穿過細(xì)胞膜，進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)后，可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解生成DCFH。而DCFH不能通透細(xì)胞膜，從而使探針很容易被裝載到細(xì)胞內(nèi)。細(xì)胞內(nèi)的活性氧可以氧化無熒光的DCFH生成有熒光的DCF。檢測(cè)DCF的熒光就可以知道細(xì)胞內(nèi)活性氧的水平。
本試劑盒提供了活性氧陽(yáng)性對(duì)照試劑Rosup，以便于活性氧的檢測(cè)。Rosup是一種混合物(compound mixture),濃度為50mg/ml。
本試劑盒本底低，靈敏度高，線性范圍寬，使用方便。
本試劑盒S0033S包裝可以測(cè)定100-500個(gè)樣品，S0033M包裝可以測(cè)定500-2500個(gè)樣品。
產(chǎn)品使用說明：
1. 裝載探針
對(duì)于刺激時(shí)間較短(通常為2小時(shí)以內(nèi))的細(xì)胞，先裝載探針，后用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞。對(duì)于細(xì)胞刺激時(shí)間較長(zhǎng)(通常為6小時(shí)以上)的細(xì)胞，先用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞，后裝載探針。
原位裝載探針：本方法僅適用于貼壁培養(yǎng)細(xì)胞。按照1:1000用無血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10微摩爾/升。去除細(xì)胞培養(yǎng)液，加入適當(dāng)體積稀釋好的DCFH-DA。加入的體積以能充分蓋住細(xì)胞為宜，通常對(duì)于六孔板的一個(gè)孔加入稀釋好的DCFH-DA不少于1毫升。37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。用無血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次，以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的DCFH-DA。通?；钚匝蹶?yáng)性對(duì)照在刺激細(xì)胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。
收集細(xì)胞后裝載探針：按照1:1000用無血清培養(yǎng)液稀釋DCFH-DA，使終濃度為10微摩爾/升。細(xì)胞收集后懸浮于稀釋好的DCFH-DA中，細(xì)胞濃度為一百萬至二千萬/毫升，37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育20分鐘。每隔3-5分鐘顛倒混勻一下，使探針和細(xì)胞充分接觸。用無血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞三次，以充分去除未進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的DCFH-DA。直接用活性氧陽(yáng)性對(duì)照或自己感興趣的藥物刺激細(xì)胞，或把細(xì)胞等分成若干份后刺激細(xì)胞。通?；钚匝蹶?yáng)性對(duì)照在刺激細(xì)胞20-30分鐘后可以顯著提高活性氧水平。
說明：僅在陽(yáng)性對(duì)照孔中加入Rosup作為陽(yáng)性對(duì)照，其余孔不必加入Rosup。
2. 檢測(cè)
對(duì)于原位裝載探針的樣品可以用激光共聚焦顯微鏡直接觀察，或收集細(xì)胞后用熒光分光光度計(jì)、熒光mei biao yi或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。對(duì)于收集細(xì)胞后裝載探針的樣品可以用熒光分光光度計(jì)、熒光mei biao yi或流式細(xì)胞儀檢測(cè)，用激光共聚焦顯微鏡直接觀察也可以。
3. 參數(shù)設(shè)置
使用488nm激發(fā)波長(zhǎng)，525nm發(fā)射波長(zhǎng)，實(shí)時(shí)或逐時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)刺激前后熒光的強(qiáng)弱。DCF的熒光光譜和FITC非常相似，可以用FITC的參數(shù)設(shè)置檢測(cè)DCF。
產(chǎn)品組分：
S0033S-1DCFH-DA(10mM)0.1ml
S0033S-2活性氧陽(yáng)性對(duì)照(Rosup, 50mg/ml)1ml
說明書1份
儲(chǔ)存與運(yùn)輸：
-20℃保存，一年有效。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息：
品牌 貨號(hào) 名稱 規(guī)格
Beyotime P0131-5ml 抗熒光淬滅封片液(含DAPI)5ml 5ml
Beyotime P0131-25ml 抗熒光淬滅封片液(含DAPI)25ml 25ml
關(guān)于公司：
Beyotime創(chuàng)辦于2001年。近20年來專注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司，為 特新“小巨人"企業(yè)，并進(jìn)一步入選 批 年建議支持的專精特新“小巨人"企業(yè)， 也是G60科創(chuàng)走廊一類重點(diǎn)扶持企業(yè)和上海市專精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省高新技術(shù)企業(yè)，南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備。
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