產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
品牌 | 康為世紀(jì) |
貨號(hào) | CW2646 |
用途 | DNA提取 |
英文名稱 | NuClean FFPE DNA kit |
包裝規(guī)格 | 200preps |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) CW2646 新型固定組織基因組DNA提取試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):CW2646
產(chǎn)品品牌:康為世紀(jì)
產(chǎn)品產(chǎn)地:國(guó)內(nèi)
產(chǎn)品規(guī)格:200preps
用途范圍:DNA提取
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適用于從fu er ma lin固定、石蠟包埋組織中有效純化基因組DNA。本品使用專門優(yōu)化脫蠟劑和裂解液,釋放fu er ma lin固定或組織切片樣本中的DNA,不涉及有機(jī)試劑er jia ben,無(wú)需過(guò)夜操作;消化后的樣品在較高的溫度孵育后,去除游離DNA的fu er ma lin交聯(lián),有效提高DNA的產(chǎn)量和純度;優(yōu)化的緩沖系統(tǒng)使裂解液中的DNA可特異結(jié)合到吸附膜上,抑制劑通過(guò)兩步漂洗步驟有效去除, 使用低鹽緩沖液或水洗脫,即可獲得高純度DNA。同時(shí)配置高效微量吸附柱,洗脫體積可低至20μl。經(jīng)過(guò)純化的DNA可以直接用于PCR、Real-time PCR、SNP 基因分型、STR基因分型、二代測(cè)序和藥物基因組學(xué)研究等。
從fu er ma lin固定、石蠟包埋樣本中分離的DNA分子量通常低于新鮮或冷凍樣本中的DNA。核酸片段化的程度取決于樣本類型、儲(chǔ)存時(shí)間以及固定的條件。
產(chǎn)品組份:
配套試劑:
無(wú)水乙醇
產(chǎn)品使用說(shuō)明:
1.樣本處理:
1a.石蠟包埋樣本:將組織塊中多余的石蠟修剪掉,露出組織后切成5-10 μm的薄片。取約1×1 cm2的切片(共約4-5片切片)置于離心管(自備)中,加入500μl Buffer DS,渦旋震蕩10秒。56°C孵育3分鐘。12,000 rpm離心2分鐘,小心吸棄上清,注意不要吸到沉淀。可用小槍頭(10 μl) 小心去除殘留的脫蠟液。
1b.fu er ma lin等固定液中的樣本:取約20 mg的樣本,切成小塊,置于離心管中,加入500 μl 10mM PBS(PH7.4),渦旋振蕩,12,000 rpm(~13,400×g)離心1分鐘,棄上清,重復(fù)3次。
2.上述管中加入180 μl Buffer GTL,重懸沉淀,加入20 μl Proteinase K,渦旋震蕩混勻。
3.56℃孵育1小時(shí),直至樣品完全溶解。90℃孵育1小時(shí)。12,000 rpm離心1分鐘,使用200 μl槍頭沿管壁小心吸取下層的水相于新的離心管中。
4.加入20ul Proteinase K,65℃,450rpm孵育15 min 。
5.加入200 μl Buffer GL,渦旋震蕩混勻后加入200 μl無(wú)水乙醇,渦旋震蕩 混勻。短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底
6.將步驟5所得溶液全部加入已裝入收集管的吸附柱(Spin Columns DF)中,若一次不能加完溶液,可分多次轉(zhuǎn)入。12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
8.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
9.12,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘以 晾干
10.將吸附柱置于一個(gè)新的1.5 ml收集管中,向吸附柱的中間部位懸空加入20-100 μlBuffer EB或滅菌水,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
運(yùn)輸與儲(chǔ)存:
Spin Columns DF室溫下可保存2個(gè)月,2-8℃保存1年
其余組分常溫 (15-25℃)保存
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
品牌 貨號(hào) 名稱 規(guī)格
康為世紀(jì) CW2646S 新型固定組織基因組提取試劑盒 50preps
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