產(chǎn)地 | 國內(nèi) |
品牌 | 康為世紀(jì) |
貨號 | CW2107M |
用途 | 適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染 |
包裝規(guī)格 | 10 preps |
純度 | % |
別名 | 無內(nèi)毒素質(zhì)粒大提試劑盒 |
是否進(jìn)口 | 否 |
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) CW2107M 超量無內(nèi)毒素質(zhì)粒大提試劑盒 負(fù)壓法
產(chǎn)品貨號:CW2107M
產(chǎn)品品牌:康為世紀(jì)
產(chǎn)品產(chǎn)地:國內(nèi)
產(chǎn)品規(guī)格:10 preps
用途范圍:適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染
保存條件:室溫 (15-30℃)
產(chǎn)品介紹:
內(nèi)毒素是質(zhì)粒提取中常見的污染物,由于真核細(xì)胞對內(nèi)毒素非常敏感,因此,如果質(zhì)粒中含有內(nèi)毒素會大大降低真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本試劑盒提供一種快速、易大規(guī)模質(zhì)粒制備的新方法。每次可處理100-300 ml菌液,獲得多至2 mg轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA。使用真空裝置可同時(shí)純化多個(gè)樣本,45分鐘即可完成質(zhì)粒提取,有效減少手動操作時(shí)間。特殊的緩沖液系統(tǒng)和除內(nèi)毒素過濾器,有效去除內(nèi)毒素、基因組DNA、RNA、蛋白等雜質(zhì)。本試劑盒所得質(zhì)粒純度高、提取量大,特別適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染,同時(shí)也可用于DNA測序,PCR,體外轉(zhuǎn)錄,內(nèi)切酶消化等實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品組份:
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.提取速度快:利用真空裝置,40分鐘內(nèi)快速純化多個(gè)樣本,有效減少手動操作時(shí)間
2.提取得率高:可從100-300 ml菌液,獲得多至2 mg轉(zhuǎn)染級質(zhì)粒DNA。
3.產(chǎn)品品質(zhì)高:提取的質(zhì)粒DNA適用于大多數(shù)細(xì)胞株的高級轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
配套試劑:
無水乙醇、yi bing醇、真空泵、廢液收集裝置、真空純化裝置。
產(chǎn)品使用說明:
1.取100-300 ml過夜培養(yǎng)的菌液,加入離心管(自備)中,12,000×g離心2-3分鐘收集細(xì)菌,盡量吸棄全部上清。
2.向留有菌體沉淀的離心管中加入12 ml Buffer P1(請先檢查是否已加入RNase A),使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻,懸浮細(xì)菌沉淀
3.向離心管中加入12 ml Buffer P2,溫和地上下顛倒混勻8-10次,使菌體充分裂解,室溫放置3-5分鐘。此時(shí)溶液應(yīng)變得清亮粘稠。
4.向離心管中加入12 ml Buffer E3,立即上下顛倒混勻8-10次,此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀,室溫放置5分鐘。將溶液全部倒入除內(nèi)毒素過濾器中,慢慢推動推柄過濾,濾液收集在干凈的50 ml離心管中。
5.向?yàn)V液中加入0.3倍濾液體積的yi bing醇,上下顛倒混勻
6.正確連接負(fù)壓裝置,將連接管與DNA吸附柱連接好后插到負(fù)壓裝置的插口上
7.柱平衡:向DNA吸附柱中加入2 ml Buffer PS,開啟并調(diào)節(jié)負(fù)壓至-300~-700 mbar,吸去柱上溶液。
8.將步驟5中濾液與yi bing醇的混合溶液轉(zhuǎn)移到平衡好的吸附柱中,吸去柱上溶液。
9.向DNA吸附柱中加入10 ml Buffer PW吸去柱上溶液。
10.保持負(fù)壓抽吸10分鐘,除去吸附膜內(nèi)殘留漂洗液,干燥吸附膜。若一次抽吸6個(gè)樣品以上,可將負(fù)壓抽吸時(shí)間適當(dāng)延長。待吸附膜 干燥后,關(guān)閉負(fù)壓開關(guān)。
11.將壓力恢復(fù)至0 mbar時(shí),取下吸附柱,將DNA吸附柱置于一個(gè)新的50 ml離心管中,向吸附膜的中間部位加入1-3 ml Endo-Free Buffer EB,室溫放置2-5分鐘,12,000×離心5分鐘,將質(zhì)粒溶液收集到離心管中。-20℃保存質(zhì)粒。
產(chǎn)品訂購信息:
品牌 貨號 名稱 規(guī)格
康為世紀(jì) CW2107S 超量無內(nèi)毒素質(zhì)粒大提試劑盒 2 preps
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