產(chǎn)品品名：一步法支原體檢測試劑盒 50T
產(chǎn)品型號：T102
產(chǎn)品規(guī)格： 50次/份
產(chǎn)品商標(biāo)：美國CLARK Bioscience
產(chǎn)品簡介：
CLARK一步法支原體檢測試劑盒（One-Step Quickcolor Mycoplasma Test Kit）是目前最為快速、方便、靈敏的支原體檢測產(chǎn)品，只需要加1ul細(xì)胞培養(yǎng)上清，放入水浴一個步驟，就可以肉眼觀察結(jié)果。特別方便、快捷，同類競爭產(chǎn)品根本無法望其項背。
該試劑盒可以檢測多種支原體（例如 M. Hyorhinis，M. Fermentans，M. Arginini，M. Hominis，M. Orale，M. Salivarium，M. Pirum，Aholeplasma Laidlawii，M. Agalactiae，M. Bovis， M. Buccale，M. Arthritidis，M. Pulmonis ) 具有極高的靈敏度和特異性。上述七種支原體占細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的 98% 以上。
儲存和穩(wěn)定性：
產(chǎn)品在 4 ℃ 下運(yùn)輸。收到后將所有組件儲存在-20 ℃。在這些條件下，產(chǎn)品至少可以穩(wěn)定兩年。
套件組件：
1.Solution 1: 1150 μL (50 Test)
2.Solution 2: 50 μL (50 Test)
3.煮沸支原體DNA：50 μL
4.礦物油：1500 μL
使用程序：
1.樣品制備：
細(xì)胞系在檢測前應(yīng)預(yù)培養(yǎng)至少 3 天。樣品應(yīng)來自融合度為 70-90% 的培養(yǎng)物。細(xì)胞培養(yǎng)上清液可以直接檢測。
2.反應(yīng)系統(tǒng)設(shè)置：
(1)總反應(yīng)體積為25 μL。建議進(jìn)行陽性和陰性對照反應(yīng)。在室溫或 37 ℃下解凍溶液 1 并充分混合。溶液 2 應(yīng)始終保存在 -20 ℃。根據(jù)表 1 設(shè)置反應(yīng)系統(tǒng)。
(2) 移液數(shù)次混合，每 0.2 mL PCR 管中加入 24 μL。
(3)在陽性對照管中加入1 μL支原體DNA，在試管中加入1 μL細(xì)胞培養(yǎng)上清液。
反應(yīng)：選擇以下反應(yīng)方法之一：
(1)在水浴上反應(yīng)。向每個管中加入 25 μL 礦物油以防止水分蒸發(fā)，并將管置于 61°C 的水浴中 60 分鐘。
(2)在熱循環(huán)儀PCR儀上反應(yīng)。由于一般水浴溫差較大，如果有PCR儀，請在PCR儀上進(jìn)行反應(yīng)。如果 PCR 儀的蓋子可以設(shè)置為 100°C，則不需要在每個管中添加礦物油。PCR 儀設(shè)置如下：61 ℃，60 min；10 ℃，∞；蓋子，100 ℃。
3.結(jié)果分析：反應(yīng)后，如果反應(yīng)管的溶液顏色為紫紅色，則說明試樣中沒有支原體存在。如果反應(yīng)管的溶液顏色為藍(lán)綠色，則表明測試樣品被支原體污染（圖1）。
通過顏色變化進(jìn)行的結(jié)果分析。
筆記：
. 如果反應(yīng)在水浴中進(jìn)行，請使用水銀溫度計確保溫度準(zhǔn)確。
. 61°C 下的反應(yīng)時間不應(yīng)超過 65 分鐘。
. 反應(yīng)結(jié)束后，請勿打開反應(yīng)管。
