產品名稱：Cygnus CHO HCP宿主蛋白殘留ELISA試劑盒
產品貨號：F550
產品規(guī)格：96T/盒
產品品牌：Cygnus
產品簡介：
CHO HCP是第三代ELISA試劑盒，比之前試劑盒具有更廣泛反應性。新型試劑盒在檢測CHO HCPs 蛋白方面有很多改進。新試劑盒具有更高的靈敏度，在抗體物和其它CHO表達蛋白中檢測HCP蛋白可以精確到到十億分之一百。第三代ELISA試劑盒經過大量藥物原料和中試樣品檢測評估，是工藝開發(fā)和大量釋放試驗檢測的通用方法?？贵w反應性使用傳統(tǒng)2D 蛋白雜交技術（2D HPLC-ELISA）鑒定。2D HPLC-ELISA方法顯示抗體對超過750種HCPs都具有反應性。用蛋白檢測方法和ELISA正交試驗表明這750種HCPs相當于98%總蛋白量。因此，這種抗體可以避免丟失任何重要的HCP蛋白。產品使用時一定要做好保護措施：0.5M硫磺酸有強腐蝕性，要避免接觸眼睛、皮膚和衣物。檢測前所有試劑都要平衡到室溫。
產品組份：
● Anti-CHO:HRP（辣根過氧化物酶） 1x12mL F551（Product#）
● Anti-CHO微量滴定板 12x8孔 F552
● CHO HCP標準液（0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL） 1mL/瓶 F553
● Stop Solution終止液（0.5M硫磺酸） 1x12mL F006
● TMB （3,3’,5,5’-四甲基聯苯氨） 1x12mL F005
● Wash Concentrate清洗物（20倍濃縮） 1x50mL F004
檢測原理：
CHO檢測是一個雙位點酶聯免疫檢測。樣本中包含的CHO HCPs蛋白與標記有抗-CHO抗體的辣根過氧化物酶同時反應，反應發(fā)生在之前涂有一層吸附性抗-CHO蛋白抗體的微量滴定板中進行。免疫反構成為夾層式結構：固相抗休-HCP-酶標記抗體。反應結束后清洗微量滴定板去除未結合反應物。添加TMB作用底物反應。微量滴定板讀數器上測定水解物濃度，水解物濃度與CHO HCPs蛋白濃度成比例。用提供的標準液繪制標準曲線，根據讀數可以計算出CHO HCPs蛋白含量。
檢測過程：
取出所有試劑平衡到室溫→移取100μl anti-CHO:HRP（#F551）至每孔→分別移取50μl標準液，對照物和樣品至待測孔→密封滴定板，搖床室溫溫育2小時，180rpm→清空小孔，用紙吸干殘留液，350μl清洗緩沖液清洗4次→加100μl TMB 作用物（#F005）→室溫靜置30分鐘，不需搖床→加100μl反應終止液（#F006）→分光光度計450/650nm讀數
結果分析：
標準液（0, 1, 3, 12, 40, 100ng/mL）可用于制作標準曲線，標準液濃度相當于免疫反應HCP總濃度。根據測定的小孔中標準液吸光值繪制標準曲線。數據分析可以使用計算機選配曲線，例如點到點，三次樣本函數，或四參數邏輯曲線。不要使用線性回歸分析修改樣品吸光值，這樣會出現顯著誤差。也可以手工繪圖，Y軸標注吸光值，X軸標注濃度，然后用光滑曲線連接各點。然后根據樣品吸光值計算出樣品中HCP濃度。（操作時每一濃度標準液都要滴定到兩個小孔中，以便計算平均分光光度值，樣品也需計算平均吸光值）。
相關訂購信息：
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關于公司：
Cygnus公司專為疫苗生產企業(yè)、基因工程藥企、研發(fā)部門及QA部門提供宿主細胞蛋白殘留及生物工藝污染物的ELISA檢測試劑盒，諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細胞蛋白(Host Cell Protein, HCP)的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物(BioprocessContaminant, BC)。
Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產品。生物制品生產過程中存在許多影響產品質量的殘留物，諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度極高的一系列用于檢測生物工程殘留物的產品。共有39種Elisa 檢測試劑盒，包括原核、真核表達細胞宿主蛋白檢測試劑盒，細胞培養(yǎng)殘留物檢測試劑盒等
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