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zymo EZ DNA甲基化-啟動(dòng)套件 現(xiàn)貨
  • 品牌:zymo
  • 產(chǎn)地:美國
  • 貨號(hào):D5024
  • 發(fā)布日期: 2021-02-03
  • 更新日期: 2024-09-14
產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 美國
品牌 zymo
貨號(hào) D5024
用途 DNA的完全異硫化
包裝規(guī)格 50 Rxns.
純度 %
是否進(jìn)口

產(chǎn)品亮點(diǎn):

  • 雙硫酸鹽轉(zhuǎn)化的完整解決方案。該一體套件包含用于雙硫酸鹽轉(zhuǎn)化DNA的試劑,無需純化,甲基化人類DNA與控制底轉(zhuǎn),以及一個(gè)強(qiáng)大的熱啟動(dòng)PCR聚合酶,專門配制為雙硫酸鹽轉(zhuǎn)化DNA。

  • 專為*需要整合產(chǎn)品以控制雙硫化轉(zhuǎn)化的用戶而設(shè)計(jì)。

  • 試劑盒包括:一個(gè)EZDNA甲基化-直接試劑盒,一個(gè)完全甲基化通用甲基化人類DNA標(biāo)準(zhǔn),和ZymoTaqDNA聚合酶。

產(chǎn)品描述:




EZ DNA甲基化-啟動(dòng)套件為DNA的完全異硫化轉(zhuǎn)化提供了必要的工具,用于甲基化分析。該試劑盒包括允許純化DNADNA直接從血液、細(xì)胞和新鮮或FFPE組織轉(zhuǎn)化的試劑,而不受上游DNA純化的先決條件。全甲基化通用甲基化人類DNA標(biāo)準(zhǔn)為PCR提供了一套特殊的底轉(zhuǎn),用于評(píng)估轉(zhuǎn)化效率。*,包括一種獨(dú)特的ZymoTaq DNA聚合酶,用于雙硫化處理DNA的強(qiáng)擴(kuò)。

技術(shù)規(guī)格




適用于

回收的DNA是下游分析的理想的選擇,包括PCR、內(nèi)核糖酶消化、測(cè)序、微陣列等。

應(yīng)用

純化、轉(zhuǎn)化的DNA具有高質(zhì)量,非常適合下游工藝,包括下一代測(cè)序、PCR擴(kuò)增等的庫準(zhǔn)備。

轉(zhuǎn)換

> 99.5%

洗脫體積

≥ 10 μl

設(shè)備

帶加熱蓋和微離心的熱循環(huán)器。

輸入

含有50皮克至2μgDNA的樣品。為了獲得*結(jié)果,輸入DNA的量應(yīng)在200500納克。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)治療的細(xì)胞數(shù)量范圍為 10-105細(xì)胞。

處理時(shí)間

4 小時(shí)

恢復(fù)

> 80%

示例源

血液、組織、細(xì)胞、FFPE、LCM衍生樣品、純化基因組DNA、內(nèi)核糖核酸消化DNA、線性質(zhì)粒DNA等。

 

問題 1:導(dǎo)致轉(zhuǎn)換效率低/低產(chǎn)量的是*?

轉(zhuǎn)換效率低和低產(chǎn)量可能是由于各種不同的實(shí)驗(yàn)特定條件。請(qǐng)聯(lián)系技術(shù)支持部門,討論您的特定實(shí)驗(yàn)條件,并與產(chǎn)品*進(jìn)一步排除故障。

問題2:*量化/可視化轉(zhuǎn)化DNA?

在基因組DNA的二乙基纖維處理后,非甲基化細(xì)胞氨酸殘留物被轉(zhuǎn)化為烏拉西爾?;謴?fù)的DNA通常為 AU T 富。原始基座配對(duì)不再存在。相反,它是單絞合與有限的非特定基配對(duì)在室溫下。260 nm 的吸收系數(shù)與RNA相似。在確定回收的二硫化處理DNA的濃度時(shí),對(duì)Ab260 = 1.0使用值為40μg/ml。要可視化,在阿加羅斯凝膠上運(yùn)行轉(zhuǎn)換后的 DNA,然后在冰上冷卻凝膠 30 分鐘。預(yù)期的涂片將在100-1500bp之間。

問題3:可以恢復(fù)的最小DNA大小是*?

> 50 bp.

Q4 雙硫化基轉(zhuǎn)化DNA-20°C穩(wěn)定多長時(shí)間?

轉(zhuǎn)化的DNA應(yīng)在M-洗脫緩沖液中洗脫,以保持轉(zhuǎn)化后的DNA長期穩(wěn)定儲(chǔ)存。如果正確存儲(chǔ)長期 <-20C),樣品應(yīng)持續(xù)一個(gè)月。盡量減少凍結(jié)/解凍,以保持雙硫纖維轉(zhuǎn)化的DNA穩(wěn)定。

問題 5 雙硫化轉(zhuǎn)換是否僅在 CpG 上下文中發(fā)生?

無論背景*,Bisulfite 轉(zhuǎn)化都有效,因此該試劑盒與來自植物和其他非 CpG 甲基化水平高的物種的基因組 DNA 兼容。

問題 6 是否建議使用脫硫緩沖液超過 20 分鐘的孵育?

將脫硫緩沖器留在列上的時(shí)間比建議的要長,將導(dǎo)致更多的降解,進(jìn)而導(dǎo)致產(chǎn)量降低。

問題7:建議使用二硫化基轉(zhuǎn)化DNA進(jìn)行擴(kuò)增,使用哪種聚合酶?

ZymoTaq DNA聚合酶專為雙硫酸鹽擴(kuò)增反應(yīng)而設(shè)計(jì)。ZymoTaq 可作為獨(dú)立聚合酶 E2001/E2002)、預(yù)混合 E2003/E2004 qPCR 預(yù)混合 E2054/E2055 提供。

Cat #

Name

Size

E2003

ZymoTaq PreMix

(50 Rxns.) (2   x 625 μl)

D5020

EZ DNA   Methylation-Direct Kit

50 Rxns.

D5011

Universal   Methylated Human DNA Standard

Human



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