產(chǎn)地 | 美國 |
品牌 | zymo |
貨號 | D5024 |
用途 | DNA的完全異硫化 |
包裝規(guī)格 | 50 Rxns. |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
產(chǎn)品亮點:
雙硫酸鹽轉化的完整解決方案。該一體套件包含用于雙硫酸鹽轉化DNA的試劑,無需純化,甲基化人類DNA與控制底轉,以及一個強大的熱啟動PCR聚合酶,專門配制為雙硫酸鹽轉化DNA。
專為*需要整合產(chǎn)品以控制雙硫化轉化的用戶而設計。
試劑盒包括:一個EZDNA甲基化-直接試劑盒,一個完全甲基化通用甲基化人類DNA標準,和ZymoTaqDNA聚合酶。
EZ DNA甲基化-啟動套件為DNA的完全異硫化轉化提供了必要的工具,用于甲基化分析。該試劑盒包括允許純化DNA和DNA直接從血液、細胞和新鮮或FFPE組織轉化的試劑,而不受上游DNA純化的先決條件。全甲基化通用甲基化人類DNA標準為PCR提供了一套特殊的底轉,用于評估轉化效率。*,包括一種獨特的ZymoTaq DNA聚合酶,用于雙硫化處理DNA的強擴。
適用于 | 回收的DNA是下游分析的理想的選擇,包括PCR、內核糖酶消化、測序、微陣列等。 |
應用 | 純化、轉化的DNA具有高質量,非常適合下游工藝,包括下一代測序、PCR擴增等的庫準備。 |
轉換 | > 99.5% |
洗脫體積 | ≥ 10 μl |
設備 | 帶加熱蓋和微離心的熱循環(huán)器。 |
輸入 | 含有50皮克至2μgDNA的樣品。為了獲得*結果,輸入DNA的量應在200至500納克。每個標準治療的細胞數(shù)量范圍為 10-105細胞。 |
處理時間 | 4 小時 |
恢復 | > 80% |
示例源 | 血液、組織、細胞、FFPE、LCM衍生樣品、純化基因組DNA、內核糖核酸消化DNA、線性質粒DNA等。 |
轉換效率低和低產(chǎn)量可能是由于各種不同的實驗特定條件。請聯(lián)系技術支持部門,討論您的特定實驗條件,并與產(chǎn)品*進一步排除故障。
在基因組DNA的二乙基纖維處理后,非甲基化細胞氨酸殘留物被轉化為烏拉西爾?;謴偷?/span>DNA通常為 A、U 和 T 富。原始基座配對不再存在。相反,它是單絞合與有限的非特定基配對在室溫下。260 nm 的吸收系數(shù)與RNA相似。在確定回收的二硫化處理DNA的濃度時,對Ab260 = 1.0使用值為40μg/ml。要可視化,在阿加羅斯凝膠上運行轉換后的 DNA,然后在冰上冷卻凝膠 30 分鐘。預期的涂片將在100-1500bp之間。
> 50 bp.
轉化的DNA應在M-洗脫緩沖液中洗脫,以保持轉化后的DNA長期穩(wěn)定儲存。如果正確存儲長期 (<-20C),樣品應持續(xù)一個月。盡量減少凍結/解凍,以保持雙硫纖維轉化的DNA穩(wěn)定。
無論背景*,Bisulfite 轉化都有效,因此該試劑盒與來自植物和其他非 CpG 甲基化水平高的物種的基因組 DNA 兼容。
將脫硫緩沖器留在列上的時間比建議的要長,將導致更多的降解,進而導致產(chǎn)量降低。
ZymoTaq DNA聚合酶專為雙硫酸鹽擴增反應而設計。ZymoTaq 可作為獨立聚合酶 (E2001/E2002)、預混合 (E2003/E2004) 和 qPCR 預混合 (E2054/E2055) 提供。
Cat # | Name | Size |
E2003 | ZymoTaq PreMix | (50 Rxns.) (2 x 625 μl) |
D5020 | EZ DNA Methylation-Direct Kit | 50 Rxns. |
D5011 | Universal Methylated Human DNA Standard | Human |
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