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| 產(chǎn)地 | 美國 |
| 品牌 | glycotope |
| 貨號 | 10-0800 |
| 用途 | 臨床診斷 |
| 包裝規(guī)格 | 24 Tests |
| 純度 | 1% |
| 是否進口 | 是 |
MIGRATEST™ 試劑盒 BD貨號 341059 現(xiàn)貨供應??！!
產(chǎn)品名稱：MIGRATEST™
產(chǎn)品貨號：10-0800
產(chǎn)品描述：
該測試允許流式細胞術(shù)定量測定嗜中性粒細胞的趨化功能。與Boyden chamber技術(shù)類似，該試劑盒包含用于趨化性研究的多孔板和預包覆的細胞培養(yǎng)插入物、化學肽N-formyl-Met-Leu-Phe (fMLP)、抗體試劑、計數(shù)珠和必要的試劑。它允許測定通過細胞培養(yǎng)插入向趨化劑fMLP的濃度梯度遷移的中性粒細胞的數(shù)量。同時，通過分析細胞正向散射譜的變化，可以分析細胞粘附分子l -選擇素表達的減少和細胞形態(tài)的變化。
準備和存儲：將工具放在暗處2-8處(冰箱)。細胞培養(yǎng)插入物和多壁板可在室溫下保存。試劑C和E工作液使用后需棄用。試劑中提供了不影響嗜堿性粒細胞趨化功能的防腐劑。當按說明儲存時，這些試劑在包裝標簽上顯示的時間內(nèi)是穩(wěn)定的。
操作過程
1. 準備工作:
1.1用B試劑稀釋原溶液- C試劑，1:200(體積根據(jù)需要，如5 ul / 1ml，每次試驗350 ul)。試劑E, 1:50(例如:5 ul / 250 ul)每項測試20 ul)。1.2水浴預熱至37攝氏度(溫度精確控制!)1.3準備冰浴1.4流式細胞儀開機校準。
2. 白細胞隔離:從每位患者和對照組中采集5 ml肝素化全血，用標準無菌技術(shù)采集血液。不要使用EDTA或檸檬酸抗凝血!2.1將1ml肝素化全血小心覆蓋于A試劑上。2.2小瓶放置在室溫下不動。40分鐘后形成以下階段:上層包含白細胞和血小板(白細胞蛋白豐富的血漿=LRP)和下層包含紅細胞。使用較舊的血樣時，紅細胞的沉淀需要較長的時間。2.3刪除約。白細胞增多血漿(上期)500 ul。將cel懸液移入一個1ml或2ml的試管中。分離的細胞應在1小時內(nèi)用于趨化性分析。
3.MIGRATESTTM設置:3.1將試劑B或試劑C工作液滴入多孔板的兩孔中，為eac患者或?qū)φ战M準備以下樣品:負控制樣品試劑B的350ul陽性對照(試驗)樣品:試劑C工作溶液的350ul3.2將細胞培養(yǎng)插片放入雙孔。在每個細胞培養(yǎng)液中加入100 ul的富白細胞血漿。3.3培養(yǎng):多孔板在37℃水浴中孵育30分鐘，不使用shakinq。3.4在孵育時間結(jié)束時，手動將細胞培養(yǎng)插入物從多孔板中取出。從多向板的兩個孔中加入細胞懸浮液到兩個單獨的5毫升試管(試管1和試管2)，并將試管放在冰上。此外，來自富含白細胞血漿的未受刺激的細胞可以作為l -選擇素的對照。為此，將20 ul的cel懸液從陰性對照樣品的細胞培養(yǎng)瓶中與180 ul的試劑B混合，并將該混合物轉(zhuǎn)移到第三個5 ml的試管中(試管3)3.5用D試劑標記:每管添加20 ul試劑D(每個患者3管)。漩渦和孵化管10分鐘的冰浴，cov。防止暴露在陽光下3.6活體染色:每管加入1 x試劑E 20 ul，混合并在冰浴中光照保護5分鐘。測量細胞懸液在120分鐘內(nèi)
4. 流儀分析:使用藍綠激發(fā)光(488 nm氬離子激光，e.q..)流式細胞術(shù)分析細胞。FACSCaliburrM CellQuestnM軟件)
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