DNA溶液制備以后，在操作過程使用的酶或許被使用的化學(xué)品的殘留多影響。這或許包括過量的鹽，SDS, 或者其他抑制物質(zhì)。為了恰當(dāng)?shù)氖褂?/span>
DNA制備液的結(jié)果, 有時需要進行點滴透析。理想情況下，點滴透析能夠漂洗酶，去除殘留，提供更好和更加準(zhǔn)確地結(jié)果。
點滴透析的過程
在點滴透析的過程中，緩沖液加到燒杯，培養(yǎng)板，或其他容器中。最常用的緩沖液是雙蒸水。 一個VS型膜放到緩沖液上面并且光面朝上，這
個濾膜會被完全飽和，這個過程大概持續(xù)5分鐘。同時，很重要看下濾膜是否有氣泡，這些氣泡會在濾膜和緩沖液之間。DNA通過移液器緩慢滴落
到濾膜的中心處。如果DNA保持在濾膜的中間，整個的測試樣品可以放在上面。如果DNA發(fā)生了移動，那么這個DNA不適合透析。DNA不會保持在
濾膜的中心或許需要一個額外的酒精沉淀步驟。
這個容器然后蓋上約1-4個小時。等待合適的時間之后，DNA使用另外一個移液器進行重新收集，然后放入一個微量離心管中，用緩沖液將膜
進行漂洗。分光光度計或瓊脂糖凝膠電泳用來估計DNA的濃度。這時，有可能影響DNA分析結(jié)果的化學(xué)物質(zhì)應(yīng)該被去除。
盡管點滴透析可以通過其他緩沖液來進行操作，通常來說推薦雙蒸水。點滴透析的過程也可以使用一個樣本進行重復(fù)如果你發(fā)現(xiàn)仍然有沒有必
要的殘留或污染物的話. 當(dāng)重復(fù)點滴透析的過程時，使用新鮮的緩沖液和新的濾膜很重要 -- 然而樣品可以需要操作所需要的額外時間.
點滴透析的挑戰(zhàn)
點滴透析需要具備一定手工操作水平的熟練性, 因為它不像化學(xué)反應(yīng)這么簡單 -- 它需要操作人員能夠?qū)V膜正確的放置，并且能夠準(zhǔn)確地將
DNA滴到膜上. 如果DNA沒有準(zhǔn)確地滴到濾膜中心或者濾膜丟失, 這個過程或許需要重新開始. 進一步來說，濾膜或許會翻轉(zhuǎn)。
因為濾膜會在緩沖液上不可預(yù)測的移動, 強烈推薦操作人員先模擬整個操作過程在用真實的樣品操作之前。一旦這個過程被掌握后，就比較簡單
了，只要你理解了各個組分如何整體產(chǎn)生效果。新手進行操作時需要緩慢的加DNA, 這樣當(dāng)組分發(fā)生突然移動時可以做出反應(yīng)。
